Emulsion PCR全面应用于GS-Sequencing内生菌测序

作为GS-Sequencing植物内生菌测序技术的重要组成部分，微滴乳液PCR（ePCR, emulsion PCR or Micelle PCR）通过将单一模板DNA与微量的PCR缓冲体系分配到独立单元完成PCR反应。与传统的PCR相比，ePCR增加了一步分液操作，将已经混合好的包含引物、模板、DNA聚合酶的PCR反应体系物理分割成为了众多微小独立的油包水反应体系。在分配过程中，引物、酶等组分过量，而模板不过量。模板DNA分子随机进入到各个独立反应体系中，经过PCR扩增后，包含模板的体系完成扩增，不包含模板的体系无扩增。

PCR扩增完成后，通过有机醇破坏有机相液滴结构，最终通过离心在水相反应体系中得到PCR扩增产物。通过ePCR获得的扩增产物与传统PCR扩增产物的优势在于可最大程度降低嵌合体的产生，并且每个模板DNA在同样的扩增条件下可获得最大效率的扩增，准确地反映样本的实际状态，特别适合于有植物等宿主干扰下的扩增子测序。